Caracterização molecular de bactérias produtoras de polihidroxibutirato

Os polihidroxibutiratos são biopolímeros com potencial para serem utilizados como plásticos biodegradáveis, em substituição dos plásticos sintéticos. A presente investigação foi realizada com o objetivo de isolar bactérias produtoras de polihidroxibutirato e analisar a diversidade entre elas, relacionada com a sequência do gene da PHB sintase. As amostras de solo e água para o isolamento das bactérias foram recolhidas em catorze fontes diferentes. De entre cem isolados bacterianos, quarenta revelaram-se produtores de PHB após um rastreio inicial baseado em fluorescência em meio contendo azul do Nilo A. Ao testar diferentes combinações de fontes de carbono e azoto, verificou-se que 2 g de glicose como fonte de carbono e 0,65 g de nitrato de potássio eram as mais adequadas. Foram selecionadas as seis melhores estirpes acumuladoras de PHB e caracterizadas para a otimização dos meios de produção de PHB. As estirpes selecionadas produziam 59-29% de PHB em relação ao peso seco do sedimento celular. Foram testadas diferentes combinações de subprodutos agrícolas como fonte de carbono para uma produção de PHB economicamente viável, tendo-se verificado que 3 g de melaço constituíam a melhor fonte de carbono para a produção de PHB (60% do peso seco das células). A amplificação por PCR foi realizada com primers específicos do gene da PHB sintase, utilizando ADN genómico das estirpes selecionadas.