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L’acidocétose diabétique (ACD) est l’urgence hyperglycémique la plus courante chez les patients diabétiques, et elle est causée par un excès de cétones. Parmi l’ensemble des corps cétoniques, l’acide D-3-hydroxybutyrique (D-3-HB) est le principal, représentant près de 78 %. La détection du D-3-HB sérique est donc un marqueur de routine pour le diagnostic de l’acidocétose diabétique. La détection par fluorescence est la méthode la plus efficace, car elle est simple à mettre en œuvre, peu coûteuse, permet une surveillance en temps réel et offre une grande sensibilité. Ici, deux nouvelles sondes, le 4-(2-hydroxybenzylicène)thiosemicarbazide (1) et le 4-(1H-imidazo[4,5-f][1,10]-phénanthrolin-2-yl)phénol (2), ont été synthétisées et ont montré une réponse fluorescente OFF-ON particulière au D-3-HB en solution aqueuse. Les sondes 1 et 2 ont montré une réponse sélective et sensible au D-3-HB par rapport à d’autres ions métalliques, anions et acides aminés courants. De plus, le mécanisme a été confirmé par 1H-RMN et ESI-MS. En outre, cette sonde 1 a été appliquée avec succès à l’imagerie biologique, démontrant ainsi sa valeur pour des applications pratiques dans les systèmes biologiques.