Anish Khan / Samander Kaushik / Sanjit Boora
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Questa guida pratica illustra le metodologie essenziali per l’isolamento, l’identificazione e la quantificazione dei virus dell’influenza A, con particolare attenzione al ceppo H1N1pdm09, utilizzando sistemi di coltura di cellule MDCK. Il testo fornisce un flusso di lavoro completo che comprende protocolli standardizzati per il mantenimento e la subcoltura delle cellule MDCK, tecniche di propagazione virale e conferma molecolare tramite RT-PCR mirata al gene HA. Inoltre, il testo offre istruzioni approfondite sui metodi di quantificazione virale, utilizzando saggi di emoagglutinazione (HA) per determinare i titoli virali totali e saggi TCID50 utilizzando il metodo Reed-Muench per calcolare i titoli infettivi. Combinando il background teorico con dati sperimentali rigorosi e diagrammi di flusso procedurali passo-passo, quest’opera serve come risorsa vitale per i ricercatori e i professionisti di laboratorio che creano piattaforme solide per la caratterizzazione del virus dell’influenza e la scoperta di farmaci antivirali.
